Содержание
Парентеральное введение капсульной деполимеразы EnvD предотвращает смертельную ингаляционную инфекцию сибирской язвы
. 2015 декабрь; 59 (12): 7687-92.
doi: 10.1128/AAC.01547-15.
Epub 2015 5 октября.
Дэвид Негус
1
, Юлия Випонд
2
, Грэм Дж. Хэтч
2
, Эмма Л. Райнер
2
, Питер В. Тейлор
3
Принадлежности
- 1 Фармацевтическая школа Университетского колледжа Лондона, Лондон, Соединенное Королевство.
- 2 Общественное здравоохранение Англии, Портон-Даун, Солсбери, Великобритания.
- 3 Фармацевтическая школа, Университетский колледж Лондона, Лондон, Соединенное Королевство [email protected].
PMID:
26438506
PMCID:
PMC4649238
DOI:
10.1128/ААЦ.01547-15
Бесплатная статья ЧВК
Дэвид Негус и др.
Противомикробные агенты Chemother.
2015 9 декабря0003
Бесплатная статья ЧВК
. 2015 декабрь; 59 (12): 7687-92.
doi: 10.1128/AAC.01547-15.
Epub 2015 5 октября.
Авторы
Дэвид Негус
1
, Юлия Випонд
2
, Грэм Дж. Хэтч
2
, Эмма Л. Райнер
2
, Питер В. Тейлор
3
Принадлежности
- 1 Фармацевтическая школа Университетского колледжа Лондона, Лондон, Соединенное Королевство.
- 2 Общественное здравоохранение Англии, Портон-Даун, Солсбери, Великобритания.
- 3 Фармацевтическая школа, Университетский колледж Лондона, Лондон, Соединенное Королевство peter. [email protected].
PMID:
26438506
PMCID:
PMC4649238
DOI:
10.1128/ААЦ.01547-15
Абстрактный
При отсутствии лечения ингаляционная форма сибирской язвы обычно приводит к летальному исходу. Вегетативные формы Bacillus anthracis выживают в крови и тканях во время инфекции благодаря выработке защитной капсулы из поли-γ-D-глутаминовой кислоты (PDGA), которая обеспечивает неконтролируемый рост бактерий in vivo, что в конечном итоге приводит к подавляющему бациллезу и смерти. В качестве меры противодействия угрозам со стороны штаммов с множественной лекарственной устойчивостью мы оцениваем профилактический и терапевтический потенциал PDGA-деполимеразы EnvD, стабильного и сильнодействующего фермента, который быстро и избирательно удаляет капсулу с поверхности вегетативных клеток. Повторное внутривенное введение 10 мг/кг рекомбинантного EnvD (rEnvD) мышам, зараженным летальными дозами спор B. anthracis Ames путем ингаляции, предотвращало появление симптомов сибирской язвы и гибель; все животные пережили 5-дневный период лечения, а к концу 14-дневного периода наблюдения дожили 70%. В отличие от результатов у ложнолеченных животных, в легких и селезенке животных, которым вводили rEnvD, не было выраженных патологических изменений. Мы пришли к выводу, что rEnvD обладает потенциалом в качестве агента для предотвращения возникновения ингаляционной формы сибирской язвы у инфицированных животных и, вероятно, будет эффективен против лекарственно-устойчивых форм возбудителя.
Copyright © 2015, Американское общество микробиологии. Все права защищены.
Цифры
РИС. 1
Стабильность in vitro в сыворотке…
РИС. 1
Стабильность in vitro в сыворотке и элиминация rEnvD из кровотока…
РИСУНОК 1
Стабильность in vitro в сыворотке и элиминация rEnvD из кровотока мышей BALB/c. (A) Стабильность rEnvD в сыворотке мыши BALB/c. Фермент (100 нМ) инкубировали при 37°C в сыворотке и определяли активность с помощью анализа FRET (12). Ферментативную активность в относительных единицах флуоресценции переводили в концентрацию активного фермента путем сравнения со стандартной кривой. Столбики погрешностей представляют диапазон трех отдельных определений; t 1/2 в сыворотке рЭнвД составил 2,95 ч (177 мин). (B) rEnvD в сыворотке, полученной от мышей, которым внутривенно вводили 10 мг/кг rEnvD. Сыворотку получали терминальным кровотечением, а ферментативную активность определяли с помощью анализа FRET. Концентрацию rEnvD в сыворотке (Cp) получали путем сравнения со стандартной кривой. Столбики погрешностей представляют собой диапазон трех отдельных определений, выполненных в двух экземплярах. Период полувыведения, 90 111 t 90 112 90 131 1/2 90 132 , рассчитывали путем определения константы скорости элиминации ( K e ) и преобразования данных в натуральный логарифм (ln) для получения линии наилучшего соответствия для каждой фазы с наклоном, равным K e : t 1/2 = пер (2)/ К и . t 1/2 составляло 0,22 ч (13 мин) для начальной альфа-фазы между 0,5 ч и 1 ч и 2,71 ч (163 мин) для бета-фазы между 2 ч и 24 ч.
РИС. 2
Влияние внутривенного введения…
РИС. 2
Влияние внутривенного введения rEnvD на ингаляционную сибирскую язву у мышей. Комбинированный Каплан-Мейер…
Рис. 2.
Влияние внутривенного введения rEnvD на ингаляционную сибирскую язву у мышей. Комбинированные графики выживаемости Каплана-Мейера (A и C) и кумулятивные средние баллы клинического наблюдения (B и D) для инфицированных мышей BALB/c, которым вводили rEnvD. Мышей инфицировали B. anthracis Ames в день 0 аэрозолем с последующим введением в хвостовую вену либо 10 мг/кг rEnvD, либо PBS-носителя (A и B) и либо 0,5 мг/кг rEnvD или PBS (C и D) в время, указанное стрелками. Ципрофлоксацин (CIP; 118 мг/кг) также вводили перорально в течение 14 дней (C и D). Клинические наблюдения оценивались, как описано ранее (13), и основывались на тяжести симптомов (взъерошенная шерсть, закрытые глаза, выгнутая спина, неподвижность и потеря веса).
РИС. 3
B. anthracis (КОЕ/мг ткани) в…
РИС. 3
B. anthracis (КОЕ/мг ткани) в селезенке и легких мышей после rEnvD…
Рис. 3.
B. anthracis (КОЕ/мг ткани) в селезенке и легких мышей после внутривенного введения rEnvD или PBS ( n = от 7 до 10; значения являются средними ± 1 стандартное отклонение). Контрольную группу PBS забраковывали, когда клиническая оценка достигала порогового уровня, поскольку в это время животные были близки к смерти (13). Ткани взвешивали и гомогенизировали в стерильной воде, гомогенаты серийно разводили в стерильной воде и высевали на триптиказо-соевый агар и инкубировали чашки при 37°С в течение 16–24 часов.
РИС. 4
Патология легочной ткани 6…
РИС. 4
Патология легочной ткани через 6 дней после вдыхания спор. Образцы исправлены…
Рис. 4.
Патология легочной ткани через 6 дней после вдыхания спор. Образцы фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине, обрабатывали парафином, делали срезы размером 3–5 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином и исследовали с помощью световой микроскопии. Предметные стекла были рандомизированы третьей стороной перед микроскопическим исследованием, чтобы избежать предварительной информации о группе или лечении. (A) Изображения животных, получавших только носитель PBS. В этой области наблюдается ятрогенное утолщение альвеолярных стенок из-за коллапса ткани. Стрелками указаны бациллы, расположенные в альвеолярных пространствах. Ve, просвет сосуда. (B) Изображения области раздутого легкого животных, получавших 10 мг/кг rEnvD в течение 5 дней.
См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC
Похожие статьи
Деполимераза поли-γ-(D)-глутаминовой кислоты, разрушающая защитную капсулу Bacillus anthracis.
Негус Д., Тейлор П.В.
Негус Д. и др.
Мол микробиол. 2014 март; 91 (6): 1136-47. doi: 10.1111/mmi.12523. Epub 2014 9 февраля.
Мол микробиол. 2014.PMID: 24428662
Лечение экспериментальной сибирской язвы рекомбинантной капсульной деполимеразой.
Скорпион А., Тобери С.А., Рибо В.Дж., Фридлендер А.М.
Скорпион А и др.
Противомикробные агенты Chemother. 2008 март; 52(3):1014-20. doi: 10.1128/AAC.00741-07. Epub 2007, 26 декабря.
Противомикробные агенты Chemother. 2008.PMID: 18160516
Бесплатная статья ЧВК.Моноклональное антитело против капсулы полигамма-D-глутаминовой кислоты Bacillus anthracis защищает мышей от повышенной летальной активности токсина из-за заражения капсулой и спорами сибирской язвы.
Jang J, Cho M, Lee HR, Cha K, Chun JH, Hong KJ, Park J, Rhie GE.
Джанг Дж и др.
Биохим Биофиз Акта. 2013 март; 1830(3):2804-12. doi: 10.1016/j.bbagen.2012.11.006.
Биохим Биофиз Акта. 2013.PMID: 23201204
Обилтоксаксимаб (Антим) при ингаляционной форме сибирской язвы.
[Нет авторов в списке]
[Нет авторов в списке]
Med Lett Drugs Ther. 2018 10 сентября; 60 (1555): 150-151.
Med Lett Drugs Ther. 2018.PMID: 30383733
Обзор.
Аннотация недоступна.
[Сибирская язва — постоянная угроза для людей и животных].
Мизак Л.
Мизак Л.
Пшегль Эпидемиол. 2004;58(2):335-42.
Пшегль Эпидемиол. 2004.PMID: 15517814
Обзор.
польский.
Посмотреть все похожие статьи
Цитируется
Прошлое, настоящее и будущее энзимотерапии.
Хенниган Дж. Н., Линч, Мэриленд.
Хенниган Дж. Н. и соавт.
Наркотиков Дисков сегодня. 2022 Январь; 27 (1): 117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004. Epub 2021 16 сентября.
Наркотиков Дисков сегодня. 2022.PMID: 34537332
Обзор.
Геномный и фенотипический анализ изолятов Acinetobacter baumannii из трех больниц третичного уровня в Таиланде.
Лорейн Дж., Хайнц Э., Сунтарах Р., Блэквелл Г.А., Стейблер Р.А., Воравутикунчай С.П., Шриманоте П., Киратисин П., Томсон Н.Р., Тейлор П.В.
Лорейн Дж. и др.
Фронт микробиол. 2020 6 апр; 11:548. дои: 10.3389/fmicb.2020.00548. Электронная коллекция 2020.
Фронт микробиол. 2020.PMID: 32328045
Бесплатная статья ЧВК.В поисках новых противомикробных соединений: новые тенденции в исследованиях, разработках и технологиях.
Мантравади П.К., Калеш К.А., Добсон RCJ, Хадсон АО, Партасарати А.
Мантравади П.К. и др.
Антибиотики (Базель). 2019 24 января; 8 (1): 8. doi: 10.3390/антибиотики8010008.
Антибиотики (Базель). 2019.PMID: 30682820
Бесплатная статья ЧВК.Обзор.
Идентификация и характеристика капсульной деполимеразы Dpo48 из Acinetobacter baumannii фага IME200.
Лю Ю, Ми З, Ми Л, Хуан Ю, Ли П, Лю Х, Юань Х, Ню В, Цзян Н, Бай С, Гао З.
Лю Ю и др.
Пир Дж. 2019 14 января; 7: e6173. doi: 10.7717/peerj.6173. Электронная коллекция 2019.
Пир Дж. 2019.PMID: 30656071
Бесплатная статья ЧВК.Антибиотикотерапия с использованием фаговых деполимераз: надежность в различных условиях.
Лин Х. , Пафф М.Л., Молинью И.Дж., Булл Дж.Дж.
Лин Х и др.
Вирусы. 2018 12 ноября; 10 (11): 622. дои: 10.3390/v10110622.
Вирусы. 2018.PMID: 30424521
Бесплатная статья ЧВК.
Типы публикаций
термины MeSH
вещества
Дополнительные понятия
8-шаговое руководство по перевозке и продаже крупного рогатого скота
Другие темы в этом разделе
NLIS (крупный рогатый скот) расширяет возможности Австралии по поддержанию доступа к ключевым экспортным рынкам и помогает быстро локализовать крупный инцидент, связанный с безопасностью пищевых продуктов или заболеванием. NLIS позволяет отслеживать животных от рождения до убоя в целях биобезопасности, безопасности пищевых продуктов, целостности продукта и доступа к рынку.
Шаг 1. Убедитесь, что у вас есть PIC
У вас есть активный PIC? Свяжитесь с ближайшей местной земельной службой (LLS) по телефону 1300 795 299.
Шаг 2: Получите аккредитацию в программе LPA
Чтобы вывезти скот с вашей территории, вам необходимо заполнить Национальную декларацию поставщика (NVD крупного рогатого скота и накладную). Чтобы получить книгу NVD, распечатать электронный NVD (eDec) на веб-сайте LPA или заполнить и отправить форму eNVD непосредственно в NLIS, вам необходимо пройти аккредитацию в службе обеспечения животноводства (LPA).
Зарегистрируйтесь на странице MLA о программе обеспечения животноводства или позвоните по телефону 1800 683 111.
Шаг 3: Заказ национальных деклараций поставщиков (NVD)
Закажите NVD через веб-сайт LPA или по телефону. NVD выпускаются в виде книги из 20 предварительно напечатанных данных вашего PIC или доступны на веб-сайте LPA как eDec или eNVD.
Заказ в MLA О программе обеспечения животноводства или по телефону 1800 683 111.
Шаг 4: Создайте учетную запись базы данных NLIS
Все отдельные перемещения крупного рогатого скота должны быть зарегистрированы в базе данных NLIS.
- Перевозка крупного рогатого скота на склады, скотобойни или выставки и обратно осуществляется операторами скотобойни или организаторами выставок.
- Все другие перемещения скота между PIC регистрируются в базе данных NLIS владельцем или получателем скота, т.е. при покупке крупного рогатого скота на частной продаже или через интернет-аукцион.
Ваш агент по поголовью и станции может помочь вам сканировать и записывать перемещения крупного рогатого скота.
Важно, чтобы вы где-нибудь записали свой идентификатор пользователя и пароль NLIS, чтобы их можно было восстановить.
Шаг 5. Приобретите устройства NLIS
Устройства NLIS можно заказать у местного продавца в сельской местности или напрямую у производителей бирок. Разместите заказ как минимум за 14 дней до того, как они вам понадобятся.
Какие устройства заказывать?
Существует два типа устройств NLIS:
- Ушная бирка – прикрепляется к правому (внешнем) ухе
- Рубцовый болюс – вводится в рубец/ретикулум животного. Болюс поставляется с соответствующей контрольной ушной биркой, прикрепленной к правому уху, что указывает на то, что он идентифицирован с болюсом.
Ушные бирки двух цветов:
- Белый — заводские бирки и
- Оранжевый — постбридерные метки.
Устройство для выращивания (белое)
Применяется к животным, рожденным на вашей территории. Примечание. Белые устройства можно использовать для замены утерянных устройств для крупного рогатого скота, рожденного на вашей территории.
Послеродовое устройство (красное)
Применяется к крупному рогатому скоту, который больше не находится в собственности при рождении, или к интродуцированным животным, которые потеряли свою первоначальную бирку.
Шаг 6: Проверьте бирки на складе
Перед продажей любого поголовья проверьте, есть ли у каждого животного ушная бирка NLIS. Приклад без ушной бирки должен быть помечен биркой с вашим PIC. Бирки заводчика должны использоваться для домашнего разведения крупного рогатого скота, а оранжевые бирки после размножения — для купленных животных.
Позиция метки
Крупный рогатый скот должен иметь только одну метку NLIS. Недопустимо удалять тег NLIS.
Шаг 7: Завершите NVD
Перед перемещением ваших запасов необходимо заполнить NVD или другой документ о перемещении, например, Ведомость о перевозимых запасах.
- НВД является юридическим документом и должен быть правильно заполнен и подписан.
- Вы должны ответить на все вопросов документа.
- Используйте NVD для собственности фермы, если вы продаете крупный рогатый скот из фермы.
- Сохраняйте копию заполненного НВД в течение 7 лет.
Это незаконно на внесение изменений в распечатанный в НВД ПОС.
Шаг 8: Завершите перенос в базе данных NLIS
NLIS Cattle — это система на основе устройств. Выполните перевод на вашу собственность или с нее в 4 простых шага .
- Войдите в базу данных , используя свой идентификатор пользователя и пароль.
- Выберите функцию «Скот, перемещенный с или на мою территорию» . Вы можете выбрать один из трех способов ввода данных — ввести данные, загрузить файл или выбрать из списка (самый простой).
- Введите следующие данные :
a. NLIS ID или RFID
б. Дата движения
г. Из PIC
d. К PIC
e. Серийный номер NVD - Следуйте подсказкам , чтобы подтвердить детали и отправить информацию в базу данных.
Что касается крупного рогатого скота, все, что вам нужно знать для выполнения передачи NLIS, это идентификатор NLIS или RFID животных и данные NVD: PIC, откуда животные, PIC, на который вы перемещаете животных (один из них должен быть вашим PIC), дату перемещения и серийный номер ПНВ.
Скотные дворы регистрируют перемещения скота в их помещения и из них, а скотобойни регистрируют перемещения скота на бойню. Агенты могут помочь в записи перемещения крупного рогатого скота на вашу собственность после частной продажи скота.
Система нумерации NLIS
Устройство NLIS имеет два разных номера: NLIS (визуальное) ID и Устройство радиочастотной идентификации (электронное) — RFID . Система связывает эти номера с базой данных NLIS, и любой из них может использоваться для записи перемещений крупного рогатого скота.
Во избежание ошибок числа необходимо вводить в правильном формате.
NLIS (визуальный) ID
Этот номер напечатан снаружи устройства NLIS – либо на ушной бирке, либо на бирке управления болюсом. Последовательность номеров следующая:
- Красный = Идентификационный код свойства (PIC)
- Зеленый = Код производителя
- Коричневый = Тип устройства: B = Бирка заводчика
- Синий = Год выпуска: N = 2017
- Кремовый = Серийный номер
RFID (электронный)
Этот номер закодирован на микрочипе внутри устройства NLIS .